【Bio-protocol】RNA的提取和逆转录PCR

[视频作者] Bio-protocol

[视频时长] 4:12

[视频类型] 科学科普

RNA是一种极易降解的核酸分子，存在于细胞质和胞核中。利用高浓度强变性剂异硫氰酸胍可使细胞结构迅速被破坏，使RNA从细胞中释放出来，同时亦使RNA分子从核糖体蛋白中解离下来。高浓度异硫氰酸胍和β­－巯基乙醇还使细胞内的各种RNA酶失活，使释放出的RNA不被降解。十二烷基肌氨酸钠是一种离子型去污剂，能解离RNA上的核蛋白和抑制RNA酶活性，不容易析出沉淀。细胞裂解后存在于裂解溶液内的有RNA、核DNA、蛋白质和细胞碎片，通过酚、氯仿等有机溶剂处理、离心，使RNA与其它细胞组分分离出来，得到纯化的总RNA。